配制培养基是初中生物实验中的一个重要环节,以下是配制培养基的基本步骤和注意事项:
明确目的和成分
根据实验目的选择合适的培养基成分和比例。
确保培养基中各种营养物质的浓度和比例适宜,以支持微生物的生长。
称量药品
准确称取培养基所需的各种药品,放入适当的容器中。
注意药品的称量要迅速,避免吸潮。
溶解药品
将称量好的药品放入烧杯中,加入适量的水(通常是所需水量的一半)加热溶解。
若配方中有淀粉,先将其调成糊状再加热溶解。
加热过程中要不断搅拌,防止液体溢出或烧焦。
加入琼脂
固体培养基需要加入琼脂,称取1.5~2%的琼脂并加热至完全溶解。
溶化琼脂时要不断搅拌,防止糊底。
调节pH值
根据培养基的要求,使用5%的NaOH或HCl溶液调节pH值至所需范围。
用pH试纸或酸度计测定并调整pH值。
过滤和分装
将溶解好的培养基过滤,去除杂质。
根据需要将培养基分装到试管或三角瓶中,注意不要沾染管口或瓶口,以免污染。
包扎和灭菌
分装后,用棉塞塞住管口或瓶口,并用防潮纸包扎。
将分装好的培养基进行灭菌处理,通常采用高压蒸汽灭菌法。
准备用具
准备好所需的玻璃器皿、量筒、烧杯、吸管、玻璃棒、漏斗等。
准备好蒸馏水或无离子水及瓶盖或封口膜、包纸、橡皮筋等。
记录和保存
记录培养基的配方、制备过程、灭菌条件等信息。
将配制好的培养基保存于适当的条件下,以备后续使用。
通过以上步骤,可以配制出适合微生物生长的培养基。在实际操作中,还需根据具体实验需求和条件进行适当调整。